中药葛根及其近缘种的rDNA-ITS序列分析
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葛根为常用中药,来源于豆科葛属植物野葛[Pueraialobata(Willd.)Ohwi]和粉葛(P.thomsoniiBenth.)的干燥根,葛属(PuerariaDC.)植物全世界约有35种,我国已记录11种。野葛和粉葛的形态极为相近,但由于他们有效成分含量相差显著,而导致临床上的功用有差异;它们与同属的山葛[P.montana(Lour.)Merr.]在分种界限及亲缘关系上一直存在争议,而山葛则不能作为葛根入药。转录间隔区(ITS区)序列进化速度较快,其速度恰与近缘种进化较一致,因此被广泛用于高等植物近缘种的鉴别。北京军区总医院药理科通过对rDNA-ITS序列差异分析,探讨中药葛根及其近缘种的分类地位及系统发育关系,为葛根的指纹图谱鉴别提供分子标记。
方法:测定并分析葛属3种植物的内转录间隔区(ITS)序列及5.8SrRNA基因序列。结果:测得该属3种植物的片段包括ITS1,5.8S和ITS2全长序列以及18S,26S部分序列。野葛与粉葛的ITS1,ITS2的差异性分别在2.10%和2.09%以内,而山葛与野葛、粉葛在ITS1,ITS2的差异性则分别达到8.14%和12.82%以上。根据ITS序列特征构建的系统树,不同产地的野葛首先聚类,然后与粉葛聚在一起,山葛最后聚类。
结论:根据分子性状特征,粉葛作为野葛的变种,山葛独立成种较为合理。ITS序列特征是中药葛根鉴别的有效分子标记。
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