胃癌耐药细胞特异性结合短肽筛选成功

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第四军医大学西京医院消化病研究所日前用噬菌体环7肽库成功筛选到能特异性结合胃癌耐药细胞株的短肽，为肿瘤治疗或药物靶向治疗奠定了基础。
胃癌化疗失败的主要原因之一是肿瘤在化疗中出现多药耐药现象。胃癌细胞在化疗药物长期持续作用下，不仅膜表面原有的某些分子发生高表达，而且出现许多未知新分子，这些变化均与耐药密切相关。如何克隆这些未知的分子，阐明其在多药耐药发生中的机制，并阻断其作用，已成为逆转肿瘤多药耐药研究的一个热点。
为获得与胃癌耐药细胞株SGC7901/VCR特异结合的抑制耐药短肽，作为提高胃癌化疗效果的先导化合物，研究人员以SGC7901/VCR细胞为靶细胞，胃黏膜永生化上皮细胞GES、胃癌药敏细胞SGC7901为吸附细胞对噬菌体环7肽库进行了消减筛选，用细胞ELSA鉴定阳性噬菌体克隆并测序，利用竞争抑制试验确定阳性克隆的结合部位是否为外源性肽段。
结果发现，经过4轮筛选，从随机挑选的30个噬菌体克隆中得到14个能特异性与SGC7901/VCR结合而不与胃癌药敏细胞结合的阳性克隆，确定其氨基酸序列分别为SY1（命名为Ph1）和SY2（命名为Ph2）。
进一步分析筛选获得Ph1的多肽序列发现，除了其两端构成二硫健的为疏水性氨基酸之外，中间插入的7个氨基酸中有5个是亲水性氨基酸。这些氨基酸的表面概率值均较高，也就是说明这些氨基酸表面更容易暴露于溶液中，提示该亲水多肽容易形成折曲的抗原表位。因而其与靶分子结合时，类似于受体-配体的结合，亲和力高，这为设计小分子肽疫苗以及作为载体与药物提供了参考依据。