西安交大研发成功HCV抗体蛋白芯片检测新技术
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据中国医药报陕西讯 近日,西安交通大学第二医院检验科何谦博士等在一项陕西省科学技术研究发展计划项目基金课题研究中,成功研发出丙型肝炎病毒(HCV)不同片段抗体蛋白芯片检测新技术。该技术的问世,为丙型肝炎患者的确诊、献血人员的筛选及治疗药物的研发等,提供了先进的检测手段。据介绍,近年来,国内外对HCV的检测技术已越来越先进,如应用聚合酶链反应(PCR)、基因芯片等。目前,美国已采用RIBA3.0试剂检测技术。因此,研发HCV抗体蛋白芯片检测技术,已成为科研人员关注的热点。
蛋白芯片检测技术是伴随基因芯片发展起来的新技术,它是将蛋白质的分析微缩到小型芯片上,利用荧光或酶显色进行检测,并通过电脑程序分析从而得出准确结果。研制中,何谦博士等首先获取HCV融合抗原及分片段抗原,点样于醛基化玻片上,制成HCV不同片段抗体蛋白芯片,通过重复性、稳定性、特异性试验及抗-HCV的ELISA试剂法和目前国际最先进的RIBA试剂法对比,观察评估蛋白芯片的检测率和准确率。
结果发现,对20例阳性标本进行重复和稳定性试验检测,新鲜包被的蛋白芯片与正常对照组结果一致;对20份类风湿因子阳性血清标本进行特异性试验,阴性率达100%。同时还发现,经对99例蛋白芯片的融和抗原检测,其与国内ELISA试剂法相比,阴性符合率为93.8%,阳性符合率为97.1%;蛋白芯片分片段检测与国际RIBA试剂法相比,其阳性符合率为98.5%,阴性符合率为100%。提示蛋白芯片法与ELISA、RIBA试剂法检测结果相比,不仅有良好的一致性(P<0.05),而且优于其他两种检测方法。
另据研究人员介绍,在HCV检测中,加强和扩大对HCV不同编码区的抗体检测,是近年来该领域研究的一个新热点,它直接关系到检测技术的准确率和应用率。因编码区含混合抗原,由于不同抗原组合时,抗原片段浓度不同,造成抗原配伍不适合或抗原相互干扰,从而影响抗原簇位点的充分暴露,造成漏检现象。本研究表明,蛋白芯片检测与其他肝炎病毒抗体无交叉反应,可降低假阳性发生,试剂稳定性可达1年,在抗体检测、疾病诊断及药物研发中,均显示出快速、高效、高通量信息处理等优势和良好的应用前景。
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